ایمونوفلورسانس (IF)

اصول تکنیک ایمونوفلورسانس چیست؟

ایمونوفلورسانس (IF) تکنیکی است که امکان شناسایی بسیاری از اجزاء را در هر بافت یا نوع سلولی می دهد. این قابلیت گسترده از طریق ترکیبی از آنتی بادی های خاص که با فلوروفورها نشانه گذاری شده اند به دست می آید. در نتیجه، کاربردهای ممکن در تحقیق و مراقبت از بیمار بسیار زیاد است.

فلوروفور (که با نام فلوروکروم یا کروموفور نیز شناخته می شود) یک ترکیب شیمیایی فلورسنت است که می تواند با تحریک نور، نور را دوباره ساطع کند. فلوروفورها معمولاً شامل چندین گروه آروماتیک ترکیبی یا مولکول حلقوی با چندین پیوند π هستند.

فلوروفورها گاهی به تنهایی، به عنوان ردیاب در مایعات یا به عنوان رنگ برای رنگ آمیزی برخی ساختارها ، به عنوان سوبسترای آنزیم ها ، یا به عنوان یک پروب یا نشانگر استفاده می شوند (وقتی فلورسانس آن تحت تأثیر جنبه های محیطی مانند قطب یا یون ها باشد). به طور کلی آنها به صورت کووالانسی به یک ماکرومولکول پیوند می خورند و به عنوان یک مارکر (یا رنگ ، یا برچسب ، یا گزارشگر) برای واکنش‌های آفینی یا زیست فعال (آنتی بادی ، پپتیدها ، اسیدهای نوکلئیک) عمل می کنند.

از فلوروفورها به ویژه برای رنگ آمیزی بافت ها ، سلول ها یا به عنوان موادی در روش های مختلف تحلیلی ، یعنی تصویربرداری فلورسنت و طیف سنجی استفاده می شود.

مشخصات اصلی فلوروفورها عبارتند از:

• حداکثر طول موج تحریک و انتشار (نانومتر): مربوط به نقطه اوج در طیف های تحریک و انتشار است.
• ضریب جذب مولار: مقدار نور جذب شده را در یک طول موج مشخص به غلظت فلوروفور در محلول ارتباط می دهد.
• طول عمر: مدت زمان حالت برانگیختگی یک فلوروفور قبل از بازگشت به حالت اولیه آن.
• فلورسین از طریق مشتقات ایزوتیوسیانات آمین واكنش ایزوتیوسیانات فلورسئین (FITC) ، یكی از محبوب ترین فلوروفورها است. نسل های جدید فلوروفورها ، که بسیاری از آن ها اختصاصی هستند در مقایسه با رنگ های سنتی، اغلب عملکرد بهتری دارند.

مقدمه:

روشهایی که با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت انجام می شوند به دو گروه مستقیم وغیر مستقیم تقسیم می شوند.

روش ایمونوفلورسنت مستقیم یا DIFA (Assay Fluorescence Immuno Direct)

این روش کاربرد محدودتری دارد و برای جستجوی آنتی ژنهای ذره ای مانند میکروبها و سلولها و همین طور رسوب کمپلکس های ایمنی مورد استفاده قرار می گیرد، در این روش آنتی بادی اختصاصی متصل به مواد فلورسانس استفاده می شود. پس از اتصال آنتی ژن به آنتی بادی فلورسنت، نتیجه با میکروسکوپ فلورسنت بررسی می شود.

روش ایمونوفلورسنت غیرمستقیم یا IIFA (Assay Fluorescence Immuno Indirect)

این روش کاربرد زیادی در تشخیص بیماریهای خود ایمنی وبیماریهای عفونی دارد و اغلب برای جستجوی آنتی بادی درمایعات بیولوژیک خصوصاً سرم استفاده میشودکه در این روش آنتی بادی اولیه نشاندار نبوده ولی با اضافه کردن یک آنتی بادی ثانویه نشاندار قابل شناسائی خواهد بود.

روش غیر مستقیم مزیتهای زیادی دارد از جمله اینکه اولا نیازی به کونژوگه کردن آنتی بادی او با فلوروکروم نمی باشد.

ثانیاً حساسیت این روش بیشتر است چون چندین آنتی بادی ثانویه فلورسنت میتواند به آنتی بادی اولیه متصل شده ومیزان نور ساطع شده را افزایش دهد.

ثالثا دارای هزینه های کمتری است.

​ IFA ایمونوفلورسانس ​

IFA

ایمونوفلورسانس روشی برای جستجوی یک آنتی ژن یا یک آنتی بادی و تعیین موقعیت آن ها در یک برش بافتی یا سلول است . این روش برای جستجوی آنتی بادی ها واتو آنتی بادی ها در برابر عوامل عفونی، آنتی ژن های سلولی و بافتی استفاده می گردد.
روش ایمونوفلورسانس به دو روش انجام می شود:
مستقیم وغیر مستقیم.
هر دو روش مستقیم (Direct immunofluorescense) و غیر مستقیم (Indirect immunofluorescense) برپایه اتصال اختصاصی آنتی ژن - آنتی بادی استوار است. در ایمونوفلورسانس مستقیم تنها از یک آنتی بادی که به مواد فلوروسنت متصل شده است، استفاده می گردد و در روش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم از دو آنتی بادی استفاده می شود که آنتی بادی ثانویه به مواد فلوروسنت اتصال یافته است.

در ایمونو فلورسانس مستقیم که بر روی بافت بیوپسی شده انجام میگردد، حصور کلاس های مختلف آنتی بادی مانند IgG ، IgM و IgA و نیز اجزای کمپلمان (مانند C3،C4) جستجو می گردند ولی در ایمونوفلورسانس غیرمستقیم نمونه سرم بیمار جهت بررسی حضور یا عدم حضور ( و هم چنین تیتراسیون) آنتی بادی ها و اتو آنتی بادی ها استفاده می گردد.
در روش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم، سلولها یا بافت های گوناگون به عنوان آنتی ژن روی سطح اسلایدها پوشاندهشده اند، سرم بیمار روی چاهک های ایجاد شده روی این اسلایدها اضافه شده و بعد از طی انکوباسیون لازم و شستشو، آنتی بادی ضد آنتی بادی انسانی نشاندار با مواد فلورسنت مانند FITC اضافه میشود. در کنار سرم بیمار روی هر اسلاید یک کنترل منفی و یک کنترل مثبت نیز قرار داده می شود. در صورت وجود این آنتی بادی در سرم فرد به آنتی ژن موجود در اسلاید متصل شده و سپس این کمپلکس توسط آنتی بادی ثانویه کنژوگه با ماده فلوروسنت شناسایی شده که با میکروسکوپ فلوروسنت قابل مشاهده می باشد. با بررسی نمونه ها زیر میکروسکوپ فلورسنت و مقایسه الگوی فلورسنتی با الگوی حاصله از کنترل منفی وکنترل مثبت و الگو های موجود در منابع علمی تیتر و الگوی آنتی بادی هایی که بر علیه آنتی ژن تولید شده اند، مشخص می نمایند.
آزمایشگاه پاتوبیولوژی فرزان با در اختیار داشتن بهترین تجهیزات لازم برای انجام تکنیک IFA، طیف وسیعی از تستهای مورد نظر پزشکان محترم را به روش IFAبا دقت و اختصاصیت انجام می دهد. از جمله تستهایی که بااین روش در آزمایشگاه فرزان انجام میشود، می توان به موارد زیر اشاره نمود:
(Anti Nuclear Antibody (ANA
Anti-double stranded DNA (Anti-dsDNA) antibodies
همچنین آزمایشگاه فرزان مفتخر است تست تشخیص آزمایشگاهی بیماریهای خود ایمنی روماتیسمی را به صورت مولتیپلکس انجام دهد که این تست شامل CENP-B,SS-B,RNP-Sm,Sm,Scl-70,dsDNA,SS-A52,SS-A60است.
دارای عملکرد اثبات شده در بیماران تحت درمان با داروهای سرکوب کننده ایمنی تست های تخصصی مولکولی با پانل های کاملا تخصصی در آرمایشگاه فرزان انجام می شود این پانل ها شامل:
ایمنوگلوبولین ها (IgG ,IgA ,IgM,IgE )
توصیف:
ایمنوگلوبولین ها آنتی بادی های سرم هستند که توسط پلاسماسل ها تولید می شوند و جزء مهم پاسخ ایمنی همورال می باشند. اندازه گیری ایزوتایپ های مختلف ایمنوگلوبولین های سرم ممکن است در انواع نقص ایمنی، عفونت ها، آلرژیک و بیمارهای لنفوپرولیفراتیو مفید باشند.
روش:
ایمنوگلوبولین های سرم به طور رایج به وسیله روش های ایمونولوژیک مخصوص مثل ELISA اندازه گیری می شوند.
مقادیر طبیعی:
غلظت ها ممکن است بر حسب آزمایشگاه و روش های مخصوص که استفاده می شود مختصر تفاوتی داشته باشد . اما در کل مقادیر نرمال ایمنوگلوبولین های سرم در بزرگسالان سالم به این ترتیب می باشد.
IgG: 550-1900 mg/dl
IgM: 50-150 mg/dl
IgA: 60-350 mg/dl
IgE به طور معمول به مقادیر خیلی کمتری وجود دارد.
غلظت ایمنوگلوبولین های سرم به میزان رشد ، ژنتیک و فاکتورهای محیطی بستگی دارد و در این بیان آنچه از همه مهمتر است سن می باشد.
:IgG ساخته شده توسط مادر از جفت عبور می کند که شروع آن از سه ماهه اول رشد جنین می باشد.
در موقع تولد، این سهم مادر از IgG قطع می شود و سطح IgG کل به آهستگی کاهش پید امیکند تا اینکه در 6-4 ماهگی IgG مربوطه که توسط نوزاد ساخته میشود افزایش می یابد.
سطح ایمنوگلوبولین ها در کودکی افزایش پیدا می کند و معمولاً در سن 12 سالگی به غلظت بزرگسالان می رسد.
مقادیر غیر طبیعی: مقادیر بر حسب وضعیت بالینی ، درمانی و ایزوتایپ متنوع هستند.

IgE: به خاطر غلظت خیلی کم IgE در افراد نرمال( که ممکن است غلظت سرمی اصلاً IgE قابل اندازه گیری نباشد ) در روش های متداول سنجش به آن اهمیتی نمی دهند.
غلظت IgE سرم مرتبط با وضعیت آلرژیک از قبیل رینیت آلرژیک ، آسم، بیماری آتوپیک پوست ، شوک آنافیلاکسی و بعضی از آلودگی های انگلی افزایش پیدا می کند. به هر حال تعیین IgE ویژه برای آنتی ژن مخصوص در ارزیابی بیماران با بیماری آلرژیک نسبت به اندازه گیری IgE کل از اهمیت بیشتری برخوردار است.
آنتی ژن ویژه IgE Antigen-specific با تست های In vivo مثل تست خراش پوستی که برای آلرژن ها به طور ویژه استفاده می شود ، و یا به وسیله روش in vitro مثل تست radioallergosorbent مشخص گردد.

IgM: IgM به طور معمول به صورت مولکول های بزرگ و سنگین پنتامتر در گردش خون می باشد. وتماماً در عروق باقی می ماند و از جفت عبور نمی کند.
در جواب چالش آنتی ژن، این ایمنوگلوبولین ها سریع تر ساخته می شوند. کاهش سطح IgM ممکن است در عفونت های مختلف یا اختلالات اتوایمیون که در آن تحریک پلی کلونال صورت می گیرد، افزایش مونوکلونال IgM در نئوپلاسم های پرولیفراتیو سلول های B ،ماکروگلوبونیمی والدن اشتروم دیده می شود. به خاطر اندازه بزرگ آنها مولکولهای، IgM تجمع پیدا میکنند و بر ویسکوزیته پلاسما تاثیر می گذارد و باعث نشانه های کلینیکی بیشتری نسبت به سایر ایزوتایپ های ایمنوگلوبولین می شود. آنتی بادی هایی IgM که از نظر کلینیکی مهم هستند فاکتور روماتوئید و گروه های خونی ABO عمل می کنند.

IgA : غلظت سرمی IgA بازتاب دو ایزوتایپ می باشد: IgA 1و IgA 2 اگر چه اینها تقریباً به طور مساوی در سرم وجود دارند. IgA 1 ایزوتایپ اصلی IgA است که در سطوح مخاطی ترشح می شود. این ترشح جزء مهم پاسخ ایمنی به پاتوژن هایی است که در سطوح مخاطی حضور دارند. سطوح IgA سرم، ممکن است وضع عملکردی پاسخ مرتبط به IgA را منعکس نکند. حقیقتاً غلظت سرمی IgA پایین تر از کمترین حد نرمال که شایعترین اختلال هومورال سیستم ایمنی است، در یک از هر 700 نفر دیده می شود. اگر چه تعداد زیادی از بیماران بدون علامت هستند، کاهش سطح سرمی IgA ممکن است در افراد نقص ایمنی دیده شود مثل افراد با انواع CVID.

IgG: تقریباً به یک اندازه در فضای داخل عروقی وخارج عروقی وجود دارد و قریب به 80% ایمنوگلوبولین در گردش را شامل می شود و مهمترین ایزوتایپ ایمنوگلوبولین در پاسخ ثانویه ایمنی می باشد. کل IgG سرم نماینده چهار زیر مجموعه (IgG 4, IgG 3 ,IgG 2, IgG11) می باشد. که به ترتیب کاهش غلظتشان در سرم نرمال ترتیب بندی شده اند. بنابراین کاهش ایزوله IgG1 بصورت کاهش IgG کل ( همچنین به صورت کاهش جزء گاما در الکتروفورز پروتئین های سرم) تظاهر میکند. به عکس ممکن است کمبود اجزاء IgG 4, IgG 3 با سطح نرمال IgG کل ماسکه شود.
فاکتورهای مخدوش کننده:
گذاشتن نمونه در دمای اتاق برای ساعت ها ممکن است ایمونوگلوبولین را کمتر نشان بدهد. رادیو تراپی، کموتراپی، و دوزهای زیاد کورتیکواستروئید نیز ممکن است سطوح پایین تر ایمونوگلوبولین را نشان دهد.
موارد استفاده:
تعیین مقدار کمی ایمونوگلوبولین سرم IgG ,IgA ,IgM برای ارزیابی ابتدایی بیمار با شک به نقص ایمنی هومورال، مناسب است. اگر این مقدار نرمال باشد و شک قوی به نقص ایمنی همورال داشته باشیم ممکن است لازم شود که ساب کلاس های IgG یا تیترهای آنتی ژن مشخص گردد. برای مثال تیترهای سرمی آنتی بادی ضد پنوموکوک در بیماری که به طور اختصاصی واکسینه شده است.
همینطور این تست در تشخیص بعضی پاراپروتئینمیها مثل مولتپل میلوما و بیماری ماکروگلوبولینیمیای والدن اشتروم استفاده می شود.

همه چیز درمورد مالاسزیا فورفور

⚜️ویژگی‌های مربوط به جنس مالاسزیا

🔶مالاسزیاها قارچ‌های مخمری هستند که برای رشد خود وابسته به لیپیدها می‌باشند و در نواحی از پوست انسان که دارای غدد سباسه فراوانی می‌باشند مانند صورت، سر و قسمت فوقانی تنه رشد می‌کنند. اگرچه به‌عنوان بخشی از فلور نرمال پوست انسان محسوب می‌شوند اما می‌توانند در ایجاد بیماری‌های پوستی از قبیل تینا ورسیکالر (پیتریازیس ورسیکالر)، فولیکولیت پیتروسپورومی و درماتیت سبوروئیک دخالت داشته باشند. مدارک و شواهد مربوط به درگیری مالاسزیاها در سایر بیماری‌های پوستی نظیر پسوریازیس، درماتیت آتوپیک و پوسچولوز سفالیک دوران نوزادی (neonatal cephalic pustulosis) ضعیف است.

✅مخمرهای مالاسزیا اولین بار در قرن نوزده میلادی به‌عنوان مخمرهای دارای جوانه که در پوست بیماران مبتلا به دندروف دیده شده بود شرح داده شدند. دانشمندی بنام Louis-Charles Malassez این مخمرها را در قسمت خارجی اپیدرم بیماران مبتلا به درماتیت سبوروئیک شناسایی نمود.

💠تاکسونومی مالاسزیا در ابتدا کمی پیچیده بود زیرا جنسی تحت عنوان پیتروسپوروم به فرمهای مخمری اطلاق می‌گردید و نام مالاسزیا را برای فرمهای رشته‌ای (دارای هایفی) بکار می‌بردند تا اینکه با کمک روش‌های بیولوژی ملکولی در دهه 1980 ثابت شد که این دو درواقع یکی هستند. در حال حاضر 11 گونه از جنس مالاسزیا شناخته شده است و مهم‌ترین گونه‌های کلینیکی آن شامل مالاسزیا گلوبوزا، مالاسزیا فورفور، مالاسزیا سیمپودیالیس، مالاسزیا رستریکتا و مالاسزیا ابتوزا می‌باشند.

⚠️گونه‌های مختلف را بر اساس مرفولوژی، ویژگی‌های مربوط به رشد، فعالیت‌های آنزیمی و نیز با کمک روش‌های ملکولی می‌توان از یکدیگر بازشناخت. مالاسزیاها قارچ‌های دیمورفیک هستند که بسته به شرایط کشت می‌توانند به فرم مخمری و یا فرم میسلیال دیده شوند. در فرم مخمری ممکن است سلول‌های کروی، بیضوی و یا فرمهای سیلندری دیده شوند و طریقه‌ی جوانه‌زنی سلول‌های آن‌ها معمولاً به‌صورت یک‌قطبی است.

الف- مرفولوژی مالاسزیا

🌀مرفولوژی در شرایط داخل بدن (in vivo)

🌿مخمرهای جنس مالاسزیا اعضاء میکروبیوتای پوست نرمال هستند و به‌ویژه در نواحی غنی از غدد سباسه حضور دارند و در آزمایش میکروسکپی از نمونه‌های به دست آمده از این نواحی به‌آسانی مشاهده می‌شوند. روش سنتی برای آماده کردن پوسته‌ها و شوره‌های جمع‌آوری‌شده از لزیونهای پوستی استفاده از هیدروکسید پتاسیم 20 تا 30 درصد می‌باشد، اما اگر در ترکیب با پتاس به نسبت مساوی از جوهر پارکر (parker permanent blue/ black quink) استفاده شود بهتر و نمایان‌تر دیده خواهند شد.

🌐گونه‌های مالاسزیا رنگ را به‌فوریت جذب می‌کنند و بنابراین عناصر مخمری درزمینه‌ی شفاف لام میکروسکپی به رنگ آبی مشاهده می‌شوند. مرفولوژی سلولی ارگانیسم‌هایی که در نمونه‌های به دست آمده از لزیونهای پوستی مشاهده می‌شوند به‌اندازه کافی می‌تواند آن‌ها را تحت عنوان گونه‌های مالاسزیا شناسایی نماید. ویژگی عمده این سلول‌ها نحوه تقسیم سلولی آن‌ها است که به‌صورت جوانه زدن یک‌قطبی
(monopolar budding) صورت می‌گیرد و اسکار یا جسم یقه مانندی که در قاعده یا پایه‌ی جوانه از خود بجای می‌گذارند نیز به تشخیص کمک می‌کند.

♎️ اختلاف و تنوع قابل‌توجهی در شکل و مرفولوژی سلول وجود دارد و اشکال کروی، بیضوی، یا سلول‌های طویل در موارد پاتولوژیک مشاهده می‌شوند. ممکن است فرمهای مرفولوژیک متعددی یک ناحیه را کلونیزه کنند و یا گروهی از مخمرها در یک ناحیه با مرفولوژی یکسان دیده شوند. تظاهرات مرفولوژیک ارگانیسم‌ها در پوسته‌های مربوط به لزیونهای پیتریازیس ورسیکالر به لحاظ شکلی مشخصه‌ی این مخمرها و در حقیقت تشخیص آزمایشگاهی این بیماری را تسهیل می‌نماید.

➰ مالاسزيا فورفور (نام قبلي آن پيتروسپوروم اواله) يكي از گونه‌هاي مرتبط به هم مخمري است كه بطور طبيعي در سطوح پوستي انسان و بسياري از حيوانات ديگر يافت شده و بدواً بعنوان شايع‌ترين علت دندروف (شوره) محسوب مي‌گردد. بيماري حاصله در انسان تينا ورسيكالر است. اختلال پوستي ديگري بنام درماتيت سبوروئيك نيز بوسيله اين قارچ بوجود مي‌آيد.

🔶 از آنجا كه اين قارچ براي رشد خود به چربي نياز دارد، بنابر اين در نواحي پوستي كه حاوي غدد سباسه فراوان است شايع‌تر ديده مي‌شود. اين نواحي شامل پوست سر، صورت و بخشهاي فوقاني تنه است.

🔷 هنگامي‌كه قارچ به رشد سريع خود ادامه مي‌دهد، تجديد و نو شدن سلولهاي پوستي مختل شده و شوره همراه با خارش ايجاد مي‌گردد.

⚪️ گونه‌هاي ديگر مالاسزيا شامل مالاسزيا پاكي‌درماتيس Malassezia pachydermatis كه اغلب روي بدن سگ‌ها يافت مي‌شود، مالاسزيا سيمپودياليس، مالاسزيا گلوبوزا، مالاسزيا ابتوزا، مالاسزيا رستريكتا، مالاسزيا اسلوفيه، مالاسزيا اكوئي، مالاسزيا اواليس و مالاسزيا درماتيس مي‌باشند.

📝 اسامي مترادف: پيتريازيس ورسيكالر، كروموفيتوزيس، درماتومايكوزيس فورفوراسه، تينه‌آ فلاوا، آئروميا پارازيتيكا،

⛎ كليدواژه‌هاي مرتبط به اين قارچ:

Kleinenflechte, Hodi-Potsy, cutaneous fungal infection, hypopigmented macules, hyperpigmented macules, Malassezia furfur, M furfur, Pityrosporon orbiculare, Pityrosporon ovale, Malassezia ovalis, scaly macules, scaly papules, Cushing disease

تغییرات فصلی TSH و تجویز بی‌دلیل دارو

🔬اتغییرات فصلی TSH و تجویز بی‌دلیل دارو

تست TSH یکی از تست‌هایی است که برای بررسی وضعیت عملکرد تیروئید نوشته می‌شود اما به نظر می‌رسد که در تفسیر نتیجه آزمایش، باید فاکتور زمانی را هم در نظر داشته باشیم.

یک پژوهش انجام شده در ژاپن که بیش از ۷۰۰۰ شخص سالم را بررسی کرده نشان داده مقدار طبیعی TSH در فصول مختلف متفاوت است و به همین خاطر گاهی اوقات ممکن است به اشتباه برای بیمار تشخیص هایپوتیروئیدی ساب کلینیکال گذاشته و یا برایش لووتیروکسین تجویز شود.

به نظر می‌رسد در نیمکره شمالی میزان TSH در فصل زمستان در اوج خودش است و در تابستان به کمترین میزان می‌رسد.

اما نکته جالب اینجاست که مشخص شده free thyroxine (FT4) در تمام طول سال ثابت است.

بنابراین محققان این پژوهش پیشنهاد کرده‌اند که اگر افزایش جزئی TSH دیده شد، اما FT4 طبیعی بود، بهتر است دارویی تجویز نشده و مجددا دو الی سه ماه دیگر تست انجام شود.

بد نیست بدانید یک پژوهش دیگر در سال ۲۰۲۱ نشان داده ۹۰ درصد تجویز‌های غیرضروری لووتیروکسین در آمریکا به خاطر تغییرات فصلی TSH بوده است.

https://www.medscape.com/viewarticle/991095

همه چیز درباره ویروس کرونا ویروس/حمله بیوتروریسمی ویروس کرونا

🔴 عارضه کرونا تا آخر عمر باقی می‌ماند

 دانشمندان دانشگاه ووهان دریافته اند که کرونا ویروس بسیار خطرناک تر از آنچه که قبلاً تصور می شد است.

 کالبد شکافی افراد فوتی ناشی از کووید-۱۹ نشان داد که این ویروس باعث آسیب جبران ناپذیری به ریه ها و سیستم ایمنی بدن می شود. حتی اگر بیمار نیز درمان شود، آسیب به بافت ریه تا ابد با او باقی خواهد ماند. یکی از عارضه احتمالی، تنگی نفس است.

 پنگ ژیونگ کارمند بیمارستان ژون ژنان گفت: "تأثیر کووید-۱۹ بر روی بدن انسان شبیه به ترکیبی از عفونت های حاد تنفسی ویروسی (به طور خاص سندرم حاد سارس) است، زیرا هم به ریه ها و هم به سیستم ایمنی بدن آسیب می رساند.

کرونا نوعی ویروس شایع و کشنده است که موجب ایجاد عفونت در بینی، سینوس‌ها یا دستگاه تنفس فوقانی فرد می‌شود.

به گزارش ، ساختار کرونا ویروس‌ها نیز دارای یک ژنوم RNA معمولی است. افرادی که هم‌زمان دارای بیماری دیگری باشند و کودکان مبتلا به بیماری‌های قلبی، بیشتر در معرض خطر ابتلا به کروناویروس‌ها هستند.
کرونا با چه علائمی خود را نشان می‌دهد؟

کرونا با علائمی شبیه به سرماخوردگی مانند آبریزش بینی، سرفه، عطسه، لرزش دستان، گلودرد، معمولا سردرد و تب باعث ایجاد عفونت و مشکلات خفیف تا متوسط در دستگاه تنفسی فوقانی می‌شود.

افراد مسن بالای ۶۰ سال و به طور کلی کسانی که دارای سیستم ایمنی ضعیفی هستند بیشتر در معرض ابتلا به این ویروس قرار می‌گیرند. وزارت بهداشت جهانی انتقال ویروس کرونا را از انسان به انسان تأیید کرده است، اما متخصصان پزشکی در خصوص این موضوع در حال بررسی هستند تا بفهمند چه کسی می‌تواند آن را بیشتر منتقل کند. ویروس کرونا می‌تواند از طریق دست دادن با افراد مبتلا به این ویروس یا موادغذایی خیابانی مانند فست فود یا سایر غذا‌های دیگر منتقل شود.

استاد بیماری‌های عفونی نوظهور و بهداشت جهانی در دانشگاه آکسفورد در خصوص علائم ابتلا به ویروس کرونا گفته است؛ بیماران مبتلا به این ویروس تا یک هفته سرفه‌های خفیف و تنگی نفس را تجربه می‌کنند و سپس با علائم بدتری رو به رو می‌شوند. نا گفته نماند که تاکنون حدود ۱۵ تا ۲۰ درصد افراد با وضعیت جسمانی شدید و غیر قابل تحمل به بیمارستان‌ها مراجعه کرده اند.
کرونا چگونه پدید آمد؟

کرونا برای نخستین بار در اواخر دسامبر سال ۲۰۱۹ در «ووهان»، یکی از شهر‌های بزرگ چین به وجود آمده و با سرعت زیادی در حال شیوع است. مسافران یا ساکنان کشور چین با سفر به نقاط دیگر جهان باعث انتقال این ویروس به افراد می‌شوند و در همین آغاز شروع تعداد زیادی به علت مبتلا شدن به این بیماری جان خود را از دست داده اند.

مقامات چین در فاصله زمانی از تاریخ ۳۱ دسامبر تا تاریخ ۲۲ ژانویه از شناسایی بیش از ۴۰۰ نفر مبتلا به ویروس کرونا شده اند. در کشور تایلند تا کنون دو نفر به ویروس کرونا مبتلا شده اند و در ژاپن، کره جنوبی و تایوان هم هر کدام یک مورد ابتلا گزارش کرده‌اند. افراد مبتلا به این بیماری در چند روز اخیر به کشور چین سفر کرده اند.
کرونا چگونه منتقل می‌شود؟

ویروس‌ها می‌توانند از تماس انسان با حیوان منتقل شوند برای مثال ویروس سارس از گربه و ویروس «مِرس» از شتر به انسان منتقل می‌شوند. اما در خصوص ویروس کرونا هنوز مشخص نیست که چه حیوانی باعث انتقال این ویروس به بدن انسان می‌شود. افراد مبتلا به بیماری کرونا با سرفه کردن این ویروس را به دیگران منتقل می‌کنند.
کرونا درمان ندارد

برای درمان ویروس کرونا روش خاصی وجود ندارد و بیشتر اوقات علائم این بیماری به سرعت از بین می‌روند، ولی متخصصان توصیه جدی در خصوص مراقبت‌های پزشکی به بیماران دارند. در صورتی که علائمی بدتر از سرماخوردگی داشتید حتما به پزشک متخصص مراجعه کنید. متخصصان با تجویز داروی درد یا تب، دوش آب گرم، استفاده از دستگاه بخور، خواب کافی و نوشیدن مایعات می‌توانند در روند بهبود بیماری فرد تاثیرگذار باشند.

طبق گزارش‌های به دست آمده بیماران بستری، کارگران و مشتریان یک بازار عمده فروشی غذا‌های دریایی نخستین کسانی بوده اند که به کرونا مبتلا شدند و پس از آن گوشت‌های فرآوری شده، حیوانات قابل مصرف زنده مانند مرغ، الاغ، گوسفند، خوک، شتر، روباه، موش‌های بامبو، جوجه تیغی و خزندگان در دام ابتلا به این ویروس رفتند.
راه‌های پیشگیری از ابتلا به کرونا

تمامی افراد باید از تماس دست‌ها با چشم، بینی و دهان خودداری کنند و شستن دست‌ها با آب و صابون را به مدت ۲۰ ثانیه جدی بگیرند تا به ویروس کرونا مبتلا نشوند. اگر علائمی مانند سرماخوردگی در بدنتان به وجود آمد و با شک و تردید در خصوص ابتلا به ویروس کرونا مواجه بودید؛ حتما برای بررسی کامل وضعیت سلامت خود به مراکز درمانی مراجعه کنید. هنگام حضور در اماکن عمومی بهتر است از ماسک استفاده کنید و از دست دادن و بغل کردن دیگران خودداری کنید. همچنین توصیه می شود از مصرف غذاهای خیابانی و روباز خودداری کنید.

 

A SARS-like cluster of circulating bat coronaviruses shows potential for human emergence

• Vineet D Menachery,This article has been updated

Abstract

The emergence of severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) and Middle East respiratory syndrome (MERS)-CoV underscores the threat of cross-species transmission events leading to outbreaks in humans. Here we examine the disease potential of a SARS-like virus, SHC014-CoV, which is currently circulating in Chinese horseshoe bat populations1. Using the SARS-CoV reverse genetics system2, we generated and characterized a chimeric virus expressing the spike of bat coronavirus SHC014 in a mouse-adapted SARS-CoV backbone. The results indicate that group 2b viruses encoding the SHC014 spike in a wild-type backbone can efficiently use multiple orthologs of the SARS receptor human angiotensin converting enzyme II (ACE2), replicate efficiently in primary human airway cells and achieve in vitro titers equivalent to epidemic strains of SARS-CoV. Additionally, in vivo experiments demonstrate replication of the chimeric virus in mouse lung with notable pathogenesis. Evaluation of available SARS-based immune-therapeutic and prophylactic modalities revealed poor efficacy; both monoclonal antibody and vaccine approaches failed to neutralize and protect from infection with CoVs using the novel spike protein. On the basis of these findings, we synthetically re-derived an infectious full-length SHC014 recombinant virus and demonstrate robust viral replication both in vitro and in vivo. Our work suggests a potential risk of SARS-CoV re-emergence from viruses currently circulating in bat populations.

 

این مقاله در سال ۲۰۱۵ در مجله معتبر nature medicine منتشر شده
در این مقاله که کار مشترک محققان انستیتو ویروس‌شناسی ووهان وابسته به آکادمی علوم چین، دپارتمان میکروبیولوژی و ایمنولوژی دانشگاه کارولینای شمالی و مرکز تحقیقات سرطان دانا فاربر دانشگاه هاروارد هستش محققان اقدام به تولید یه ویروس ترکیبی از یک کرونا ویروس که در جمعیت خفاش‌های چینی شایع هست با کروناویروسی که موش‌ها رو آلوده میکنه کرده‌اند
نتایجشون نشون داده این ویروس ترکیبی میتونه به سرعت در جمعیت‌های انسانی منتشر بشه ‌و هیچ واکسن ‌و آنتی‌بادی منوکلونال روش موثر نیست...
احتمالا یک خطای یا عمدی باعث خروج این ویروس از ازمایشگاه شده

مدت زمان زنده ماندن ویروس کرونا/ توصیه‌های WHO (سازمان بهداشت جهانی) برای پیشگیری از کرونا

بسیار مهم/ جدیدترین توصیه‌های WHO (سازمان بهداشت جهانی) برای پیشگیری از کرونا

۱- ویروس کرونا از پوست سالم رد نمی‌شود و تا ده دقیقه روی پوست زنده است پس اگر دستکش ندارید نگران نباشید فقط نباید دست‌های خود را به بینی و دهان خود بزنید.

 ۲- ویروس کرونا در سطوح پارچه ای تا ۶-۱۲ ساعت 
و فلزی ۱۲- ۲۰ ساعت 
و در سطح استیل تا ۲۰ روز! زنده است. 

۳- این ویروس تا ۶۰- درجه سانتیگراد زنده ولی در دمای ۳۰ درجه سانتیگراد به بالا می‌میرد.
 پس بهتر است شستشوها و نظافت‌ها را با آب گرم انجام داد. 

۴- کرونا ویروس با آب گرم و مواد شوینده خانگی از بین می‌رود.

۵- لباس‌ها را زیر نور مستقیم خورشید یا روی شوفاژها خشک کنید.

۶- با آب گرم حمام کنید.

۷- به هیچ وجه آب سرد و غذای سرد نخورید، آب گرم (چای گرم ، قهوه گرم و دمنوش‌های گرم) بنوشید.

۸- کلونی (محل تجمع) اصلی این ویروس در بینی است پس مرتب بینی‌تان را با آب گرم شستشو دهید.

۹- اگر به نوشیدنی گرم دسترسی ندارید آدامس بجویید تا گلویتان مرتب با آب دهانتان مرطوب و شستشو شود.

۱۰-محل زندگی و کارتان تهویه مناسب داشته باشد.

۱۱- "مهم" در طول روز چندین مرتبه بمدت ۱۰-۱۵ ثانیه نفستان را نگهدارید و  سپس بازدم انجام دهید، اگر سرفه پیدا کردید و یا تنگی نفس حتما به مراکز درمانی مراجعه کنید.
 نگذارید به مشکل تنفسی دچار شوید و سپس به دکتر مراجعه کنید چون شاید دیر باشد. 

۱۲- اگر به بیرون از خانه می‌روید (کارمند، کارگر، مغازه‌دار و...) هستید، اولا : فاصله ۱/۵متری از دیگران را مراعات کنید و دوم: به‌علت اینکه این ویروس سنگین است (حدود۴۰۰-۵۰۰ نانومتر ) و به زمین می‌افتد پس کفش‌هایتان منبع مهم آلودگی است به هیچ وجه آنرا داخل خانه نیاورید.

۱۳- موقع عطسه کردن تا جائیکه امکان دارد از دیگران فاصله بگیرید و محکم با هر چیزی که در دسترس شما هست جلوی دهان و بینی خود را بگیرید و برای چند ثانیه ول نکنید تا تمام ترشحات جذب شود و پراکنده نشود.

۱۴- بعلت درشت بودن این ویروس هر ماسکی می‌تواند در محیط آلوده محفوظ کننده باشد (پارچه‌ای، ویبریلی، یا دستمال کاغذی و...) بشرطی که خشک باشد یعنی باید ماسک‌ها را مرتباً عوض کرد.

۱۵- لزومی ندارد همه‌ی لباس‌هایی که می‌پوشیم را بشوییم بلکه روی شوفاژ یا نور مستقیم خورشید آنرا پاک می‌کند.

۱۶- پس از شستشوی دست‌ها وقتی به جای آلوده نمیرویم دستهایمان را با کرم یا وازلین مرطوب کنیم تا به مرور زمان به اگزما دچار نشویم.

انواع تست های حساسیت میکروبی

مروری بر آزمون‌های تعیین حساسیت ضد میکروبی و روش‌های نویدبخش در آینده       

آزمون حساسیت ضد میکروبی (AST)، یکی از تکنیک‌های مهم در علم زیست شناسی مدرن است. این آزمون در پاتولوژی برای تعیین مقاومت سویه‌های میکروبی       

مروری بر آزمون‌های تعیین حساسیت ضد میکروبی و روش‌های نویدبخش در آینده   محمد صالحی- کارشناس ارشد زیست شناسی- میکروبیولوژی- جهاد دانشگاهی مشهد شعبه نیشابور علی اکبر مرادیان ایوری-کارشناس آزمایشگاه- جهاد دانشگاهی مشهد شعبه نیشابور بتول جنتی- کارشناس ارشد قارچ شناسی- جهاد دانشگاهی مشهد شعبه نیشابور مسعود مبینی- کارشناسی ارشد زیست شناسی- میکروبیولوژی- باشگاه پژوهشگران جوان دانشگاه آزاد واحد تنکابن مریم اصغر حیدری- کارشناسی ارشد زیست شناسی- میکروبیولوژی- باشگاه پژوهشگران جوان دانشگاه آزاد واحد تنکابن     آزمون حساسیت ضد میکروبی (AST)، یکی از تکنیک‌های مهم در علم زیست شناسی مدرن است. این آزمون در پاتولوژی برای تعیین مقاومت سویه‌های میکروبی مشخص به عوامل ضد میکروبی مختلف مورد استفاده قرار می‌گیرد و در پژوهش‌های فارماکولوژیکی از آن برای تعیین کارایی عوامل ضد میکروب جدید مشتق از عصاره‌های بیولوژیکی بر علیه میکروارگانیسم‌های مختلف استفاده می‌شود. روش‌های AST مختلف توسط محققان در سراسر دنیا بکار می‌رود و می‌تواند منجر به تغییراتی در نتایج بدست آمده هنگام بکارگیری گسترده روش‌های AST شود که امروزه برای نشان دادن فعالیت ضد میکروبی و تعیین حداقل غلظت مهارکننده (MIC) مواد ضد میکروب بکار می‌روند. با اینکه روش‌های AST استاندارد رایج توسط سازمان‌های مختلف مانند NCCLS[1]، BSAC[2] و EUCAST[3] تأیید شده‌اند، رهنمودهایی برای تعیین حساسیت ضد میکروبی داروی مناسب وجود دارد که این روش‌ها نباید فقط برای طیف خاصی از مواد قابل اجرا باشد و از طرفی باید قابل اصلاح نیز باشند (1). هرچند سویه استرپتوکوکوس پایوژن به پنی‌سیلین حساس باقی مانده است یک سؤال همیشه عنوان می‌شود که تا چه مدتی این حساسیت باقی می‌ماند و با کشف سویه‌های استافیلوکوکوس اورئوس که به وانکومایسین مقاومند (2) و نیز سویه‌هایی از گونه‌های اسینتوباکتر (3)، نقش تعیین حساسیت ضد میکروبی در درمان بیماری‌های عفونی مهم و مهم‌تر می‌شود. هنوز هم آنچنانکه در آزمایشگاه‌های بالینی امروزی رایج می‌باشد بسیاری از این فنوتیپ‌های مقاوم جدید به آسانی با استفاده از روش‌های تعیین حساسیت ضد میکروبی اتوماتیک تشخیص داده نمی‌شوند (4). اگرچه باکتری‌های مقاوم قبلاً فقط در واحدهای مراقبتی بیمارستان‌ها شایع بود، مقاومت چند داروئی یک موضوع مهم در میان سویه‌های عامل عفونت‌های اکتسابی از جامعه مانند سالمونلا، شیگلا و حتی نیسریا گنوره می‌باشد (5). مشکلات پیچیدۀ درمان ارگانیسم‌های مقاومی که از جامعه برخاسته‌اند و نیز در حال حاضر در محیط‌های مراقبتی انتشار یافته‌اند، رو به فزونی می‌باشد. بنابراین مسلم است که تغییرات در الگوهای مقاومت محدوده وسیعی از پاتوژن‌های باکتریایی، لزوم درمان بهینۀ بیماران و حفظ رژیم‌های درمانی را نشان می‌دهد(6). دو روش فنوتیپیک اصلی تعیین حساسیت سویه‌های میکروبی، دیسک دیفیوژن وMIC  (حداقل غلظت مهارکننده) است. در ایالات متحده، تقریباً 85% نتایج تعیین حساسیت با کمک روش‌های اتوماتیک تفسیر می‌شود در حالی که مابقی عمدتاً در نتیجه آزمون دیسک دیفیوژن می‌باشد، اما آزمایشگاه‌های بالینی نیز مجموعه‌هایی از آزمایش های غربالگری‌ و تست‌های تأییدی را برای نشان دادن مکانیسم‌های مقاومت و اطمینان از دقت گزارشات تعیین حساسیت ضد میکروبی بکار می‌برند. (جدول 1) (جدول 1) غربالگری فنوتیپیک و تست‌های تأییدی
اخیراً بیشتر روش‌های مولکولی، جهش‌ها و ژن‌های مقاومت به عامل ضد میکروب را در فنوتیپ‌های مقاوم نشان می‌دهند، این در حالیست که رایج‌ترین تست استفاده شده برای نشان دادن مستقیم استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی‌سیلین (MRSA) در نمونه‌های گرفته شده از بینی، استفاده از آزمون RT PCR می‌باشد. انواع دیگری از تست‌ها از جمله پیروسکانسینگ و PNA-FISH نیز به آزمایشگاه‌های بالینی معرفی شده‌اند (7). انتشار دیسک روش انتشار دیسک در 1940 توسعه یافت (8). هنگامی که این روش توسط سازمان NCCLS پذیرفته شد به طور گسترده‌ای تا به امروز مورد استفاده قرار گرفت. این روش توسط بوئر، کربی، شریس و تراک توصیف شد (عموماً به آزمون کربی- بوئر معروف است) (9). تکنیک انتشار دیسک معمولاً به صورت گسترده‌ای در سنجش فعالیت ضد میکروبی یک مهارکنندۀ مجهول به کار می‌رود(10). در این روش دیسک‌های کاغذی فیلتری استریل شده 6 میلی‌متری توسط عامل ضد میکروب با غلظت دلخواه اشباع می‌شود(11). دیسک‌های اشباع شده سپس روی سطح محیط‌های آگار جامد مناسب مانند مولرهینتون، تریپتوکیس‌سوی آگار یا نوترین آگار که از قبل توسط ارگانیسم‌های تلقیح شده قرار داده می‌شوند. مقدار تلقیح استاندارد  CFU/ mL 10⁸×1 برای باکتری و  CFU/ mL 10⁵×1 برای قارچ می‌باشد (12) و این با استاندارد کدورت 5/0 مک‌فارلند برابر است. برخی از پژوهشگران دیسک‌های کاغذی را قبل از قرار دادن روی پلیت‌های تلقیح شده به عامل ضدمیکروب آغشته می‌کنند، در حالی که برخی دیگر ترجیح می‌دهند بعد از قرار دادن دیسک‌های کاغذی روی پلیت‌های تلقیح شده، آن را به عامل ضدمیکروب آغشته کنند (12 و 13). زمان خشک شدن دیسک کاغذی تلقیح شده در بین محققان از 2 ساعت تا یک شب کامل زیر هود لامینار متفاوت است (12). پلیت‌های تلقیح شده به باکتری را 24 ساعت در 37 درجه سانتیگراد و تلقیح شده به قارچ را 48 ساعت در 25 درجه سانتی گراد قرار می‌دهند (11). بعد از انکوباسیون قطر هاله را تا نزدیک‌ترین نقطه‌ای که در آن یک کاهش 80 درصدی رشد را به طور مشخص داریم بر حسب میلی‌متر گزارش می‌کنیم (14). آزمون انتشار چاهک اساس انتشار چاهک مشابه آزمون انتشار دیسک است. غلظت استانداردی از ماده تلقیحی را به صورت یکنواخت روی پلیت حاوی آگار بسته شده پخش می‌کنیم. سوراخ‌هایی با قطر حدود 6 تا 8 میلی‌متر توسط یک سنبه چوب پنبه‌ای در شرایط استریل در پلیت حاوی محیط کشت ایجاد می‌کنیم. حجم ثابتی از عامل ضدمیکروب را درون چاهک ریخته و در دمای بهینه و زمانی که بستگی به میکروارگانیسم تست دارد، انکوبه می‌کنیم (15). آزمون ماکرودایلوشن براث هدف از آزمون MIC بدست آوردن نتایج کمّی (میکروگرم در میلی‌لیتر) و تفکیک شده (حساس، حدواسط یا مقاوم) می‌باشد که می‌تواند درمان را به صورت دقیق‌تری به ویژه برای عفونت در بخش‌های مختلف بدن بهینه سازد تا به حداقل مقدار لازم از عامل ضد میکروب در بدن دست یابیم (مانند مایع مغزی نخاعی و استخوان در بدن). نتایج کمی MIC وقتی درمان طولانی مدت لازم است، موردنیاز است؛ مانند اندوکاردیت باکتریایی. اساس کار این آزمون مشابه آزمون میکرودایلوشن براث است، اما این آزمون در لوله آزمایش انجام می‌شود. در آزمون ماکرودایلوشن یک سری لوله‌های آزمایش با غلظت‌های مختلف از عامل ضدمیکروب (با حجم برابر) تهیه می‌کنیم. لوله‌ها را با غلظت استانداردی از میکروارگانیسم‌های مورد آزمایش انکوبه می‌کنیم. بعد از انکوباسیون، میزان کدورت لوله‌ها را به عنوان شاخص رشد بررسی می‌کنیم. (12). آزمون میکرودایلوشن براث

 

روش میکرودایلوشن براث یا میکروتیتر پلیت، تکنیکی مفید برای تعیین حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC) تعداد زیادی از نمونه‌های مورد آزمایش می‌باشد.^.(12).        پلیت مورد استفاده در روش میکرودایلوشن مولرهینتون براث یا آب مقطر استریل اغلب به عنوان یک رقیق کننده استفاده می شود.EUCAST  در سال 2003 مولرهینتون براث خاصی را برای برخی از میکروارگانیسم‌ها معرفی کرد. رقت‌های سریالی ایجاد شده از اولین چاهک محدودۀ غلظت را ایجاد می‌کند (16). مقدار تلقیح برای این روش معمولاً mL⁄  CFU10⁶×1 است (17). برخی محققان از کشت میکروبی با چگالی نوری 4/0 نزدیک به 620 نانومتر یا یک کشت مایع 12 ساعته استاندارد شده با کدورت 5/0 مک‌فارلند استفاده می‌کنند (12). حجم مساوی از کشت میکروبی را به چاهک‌ها اضافه می‌کنند (17). بعد از انکوباسیون، پلیت‌ها را برای بررسی تغییرات در کدورت به عنوان یک شاخص رشد، بررسی می‌کنند، اولین چاهکی که ظاهری روشن دارد را به عنوان  MIC در نظر می‌گیرند، برخی از محققان از شاخص‌هایی مانند نمک‌های تترازولیوم یا رنگ رزازولین یا اسپکتروفتومتری برای تعیین حضور رشد استفاده می‌کنند. در روش اسپکتروفتومتری، جذب در مقابل کنترل منفی به عنوان بلانک معمولاً در طول موج 620 نانومتر می‌باشد. کاهش سریع در مقدار جذب یا کمترین غلظتی که جذب صفر خوانده می‌شود MIC عامل ضدمیکروب می‌باشد (11). رقت در آگار بر اساس شیب یا Etest رقت در آگار بر اساس شیب غلظت، یک روش اختصاصی است (Etest، AB بیودیسک، سولنا و سوئدی نیز نامیده می‌شود) که آزمون MIC را با آزمون انتشار در دیسک ترکیب کرده است. عامل ضد میکروب پشت نوار پلاستیکی به شکل ظریفی محصور می‌شود و وقتی روی سطح آگار قرار می‌گیرد از نوار به محیط کشت منتشر می‌شود و به سرعت مدل شیب را تشکیل می‌دهد. نوار Etest قدرت مهاری یک عامل ضد میکروب را با محدوده وسیعی از غلظت‌ها ارزیابی می‌کند. چندین نوار Etset حاوی عوامل ضد میکروب مختلف را می‌توان روی یک پلیت قرار داد. روش Etest برای باکتری‌هایی مانند کمپیلوباکتر (18) پنوموکوکوس (19) و باکتری‌های بی‌هوازی مفید است و فقط مقدار محدودی از عوامل ضد میکروب برای آزمایش موردنیاز است (20). MIC دارو طوری خوانده می‌شود که حاشیه بیضی شکل هاله مهار رشد نسبت به نوار تست یک حالت متقاطع ایجاد می‌کند، در نتیجه این روش ترکیبی از اجرای سادۀ آزمون انتشار در آگار با روش رقت‌سازی در مایع است. نتایج چندین مطالعه نشان می‌دهد که نتایج Etest هماهنگی مشخصی با اطلاعات ایجاد شده توسط روش استاندارد CLSI دارد (21). بیواتوگرافی بیواتوگرافی روشی بسیار مناسب برای بررسی کردن اثرات عامل ضدمیکروب روی میکروارگانیسم‌های پاتوژن می‌باشد. بیواتوگرافی می‌تواند در جداسازی مستقیم اجزاء فعال هدف، بکار رود (22). بیواتوگرافی همچنین به عنوان یک تکنیک جداسازی مواد فیتوشیمیایی به وسیله تفکیک بیواسی[4] برای نشان دادن ترکیبات فعال بکار می‌رود (23). کروماتوگرافی روی کاغذ به دنبال بیواتوگرافی انجام می‌شود که اولین بار در سال 1946 توسط گودال و لوی برای تخمین خلوص پنی‌سیلین مورد استفاده قرار گرفت. در این روش، کاغذ کروماتوگرام مخصوص را روی لایه آگار تلقیح شده قرار می‌دهند و آنتی‌بیوتیک از کاغذ به آگار دارای میکروارگانیسم انتقال پیدا می‌کند، کروماتوگرافی لایه نازک توأم با بیواتوگرافی (TLC-B) توسط فیشر و لئوتنز در 1961 معرفی شد (24). فلوسیتومتری فلوسیتومتری (به صورت مخفف FCM) تکنیکی برای شمارش و بررسی ذرات میکروسکوپی مانند کروموزوم‌ها و سلول‌ها می‌باشد که با عبور دادن جریان مایع از مقابل یک دستگاه شناساگر الکترونیکی، شمارش می‌شوند. فلوسیتومتری اجازه تجزیه و تحلیل هزار ذره در هر ثانیه را از نظر چندین پارامتر فیزیکی و یا شیمیایی می‌دهد. یکی از موارد استفاده از این روش در پژوهش‌های مربوط به میکروبیولوژی است که به منظورتعیین زنده بودن باکتری بعد از تأثیر عامل ضدمیکروب از روش فلوسیتومتری جهت افتراق میکروارگانیسم‌های زنده از مرده استفاده می‌کنند و حتی این روش میزان زنده بودن (فعالیت و تنفس) میکروارگانیسم را مشخص می‌کند. در این روش، میکروارگانیسم‌ها در مجاورت رنگ رودامین (ماده فلورسانس) قرار گرفته و در صورت زنده بودن رنگ را جذب کرده و میکروارگانیسم خاصیت فلورسانس پیدا می‌کند. پس از این با استفاده از دستگاه فلوسیتومتر می‌توان میکروارگانیسم‌های فلورسنت شده را شناسایی و شمارش کرد، بدین ترتیب می‌توان تأثیرعوامل داروئی را بر حیات میکروارگانیسم به راحتی و به سرعت و دقت مورد مطالعه قرار داد (25). روش‌های نویدبخش در تعیین حساسیت ضد میکروبی در آیندۀ نزدیک، روش‌هایی با پیچیدگی کمتر، سهولت بیشتر برای کاربر و نسبت‌های هزینه به سود بهتری را خواهیم داشت که نتایج نویدبخشی توسط تکنیک‌های زیر بدست آمده است:

1. ارزیابی بیومس میکروبی از طریق اندازه‌گیری فعالیت متابولیکی

بیومس عناصر میکروبی که در معرض غلظت‌های مختلف داروهای ضدمیکروبی قرار گرفته‌اند ممکن است توسط روش‌های کالریمتری با استفاده از شاخص‌های رنگی که با افزایش فعالیت متابولیک میکروارگانیسم‌ها کاهش می‌یابد، تعیین شود (26). نمک 2و3 بیس{2 متوکسی 4 نیترو 5 [(سولفینیل آمین) کارنونیل] 2 اچ هیدروکسی تترازولیوم} معروف به XTT یکی از نمک‌های زرد رنگ تترازولیوم است که توسط دهیدروژنازهای میتوکندریایی قارچ‌ها به محصول فورمازان نارنجی تبدیل می‌شود که نارنجی رنگ و محلول در آب است، سپس با کمک اسپکتروفتومتری میزان تغییر رنگ نارنجی به زرد را می‌توان اندازه‌گیری کرد (27).

2. ارزیابی بیومس میکروبی از طریق اندازه‌گیری میزان مصرف اکسیژن

آراجو و همکاران روشی را برای اندازه‌گیری تغییرات بیومس عناصر ثانویه قارچی توسعه دادند تا در غلظت‌های مختلف داروهای ضد قارچی، تغییرات را در میزان مصرف اکسیژن یا تعداد کنیدی‌های حاضر در آزمایش نشان دهند. اساس چنین روشی، فرضیه‌ای است که می‌گوید اندازه کل بیومس قارچی ارتباط نزدیکی با میزان مصرف اکسیژن دارد. این تست با کمک دستگاه نمایشگر اکسیژن بیولوژیکی قرائت می‌شود (28).

3. بکارگیری سیستم ردیاب سلول زیستی (Biocell-Tracer) در تعیین حساسیت

سیستم ردیاب سلول زیستی اتوماتیک و دستی به عنوان ابزار جدیدی برای ثبت فعالیت‌های تشکیل، رشد، توسعه هیف و رویش کنیدی در مواجهه با عوامل ضد قارچی می‌باشد. سیستم BCT رشد هیف را به طور پیوسته نشان می‌دهد و وقتی یک عامل ضد قارچ اضافه می‌شود، اگر قارچ به عامل ضد قارچ، حساس باشد منحنی رشد هیف تغییر خواهد کرد. سیستم  BCTدارای جایگاهایی برای پلیت‌های تلقیح شده، میکروسکوپ، اسکنر عکس و یک کامپیوتر با نرم‌افزاری می‌باشد که اجازه نظارت اتوماتیک رشد انتهای هیفی را می‌دهد. هرچند این سیستم‌ها با نیازهای یک آزمایشگاه معمولی منطبق نیست، اما ابزاری را با پتانسیل عالی در بررسی فعالیت بیولوژیکی داروهای جدید ارائه می‌دهد یا حتی صفات اختصاصی سینرژیکی یا آنتاگونیستی ترکیبات را در داروهای ضد قارچی توصیف می‌کند (28).     منابع:

1. Hammer KA, Carson CF, Riley TV (1999). Antimicrobial activity of essential oils and other plant extracts. J. Appl. Microbiol. 86(6): 985.
2. Chang, S., Sievert, D. M., Hageman, J. C., Boulton, M. L., Tenover, F. C., Downes, F. P., Shah, S., Rudrik, J. T., Pupp, G. R., Brown, W. J., Cardo, D. & Fridkin, S. K. (2003). Infection with vancomycinresistant Staphylococcus aureus containing the vanA resistance gene. N Engl J Med 348, 1342–7.
3. Wang, S. H., Sheng, W. H., Chang, Y. Y., Wang, L. H., Lin, H. C., Chen, M. L., Pan, H. J., Ko, W. J., Chang, S. C. & Lin, F. Y. (2003). Healthcare-associated outbreak due to pan-drug resistant Acinetobacter baumannii in a surgical intensive care unit. J Hosp Infect 53, 97–102.
4. Steward, C. D., Raney, P. M., Morrell, A. K., Williams, P. P., McDougal, L. K., Jevitt, L., McGowan, J. E., Jr. & Tenover, F. C. (2005). Testing for induction of clindamycin resistance in erythromycin-resistant isolates of Staphylococcus aureus. J Clin Microbiol 43, 1716–21.
5. Tenover, F. C., Lancaster, M. V., Hill, B. C., Steward, C. D., Stocker, S. A., Hancock, G. A., O’Hara, C. M., Clark, N. C. & Hiramatsu, K. (1998). Characterization of staphylococci with reduced susceptibilities to vancomycin and other glycopeptides. J Clin Microbiol 36, 1020–27.
6. Klevens, R. M., Edwards, J. R., Tenover, F. C., McDonald, L. C.,Horan, T. & Gaynes, R. (2006). Changes in the epidemiology of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in intensive care units in US hospitals, 1992–2003. Clin Infect Dis 42, 389–91.
7. Ahmadian, A., Ehn, M. & Hober, S. (2006). Pyrosequencing: history,biochemistry and future. Clin Chim Acta 363, 83–94
8. Heatley NG (1944). Method for the assay of penicillin. Biochem. J. 38: 61-65.
9. Bauer, A. W., Kirby, W. M., Sherris, J. C. & Turck, M. (1966).Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am J Clin Pathol 45, 493–6.
10. Freixa B, Vila R, Vargas L, Lozano N, Adzet T, Caniguera S (1996). Screening for antifungal activity of nineteen Latin American plants. Phytother. Res. 12(6): 427-430.
11. Salie F, Eagles PFK, Lens HMJ (1996). Preliminary antimicrobial screening of four South African Asteraceae species. J. Ethnopharmacol. 52(1): 27-33.
12. Baris O, Gulluce M, Sahin F, Ozer H, Kilic H, Ozkan H, Sokmen M, Ozbek T (2006). Biological activities of the essential oil and methanol extract of Achillea Biebersteinii Afan. (Asteraceae). Turk. J. Biol. 30: 65-73.
13. Nostro A, Germano MP, D’Angelo V, Marino A, Cannatelli MA (2000). Extraction methods and bioautography for evaluation of medicinal plant antimicrobial activity. Lett. Microbiol. 30(1): 379-384.
14. Federal Register. (1972). Rules and regulations: antibiotic susceptibility discs. Fed Regist 37, 20525.
15. Nakano MM, Zuber P (1998). "Anaerobic growth of a "strict aerobe" (Bacillus subtilis)". Annu Rev Microbiol 52: 165–90.
16. Mendoza MT (1998). What’s new in antimicrobial susceptibility testing? Philipp. J. Microbiol. Infect. Dis. 27(3): 113-115.
17. Lourens ACU, Reddy D, Baser KHC, Viljoen AM, Van Vuuren SF (2004). In vitro biological activity and essential oil composition of four indigenous South African Helichrysum species. J. Ethnopharmacol. 9: 253-258
18. Huang, M. B., Baker, C. N., Banerjee, S. & Tenover, F. C. (1992).Accuracy of the E test for determining antimicrobial susceptibilities of staphylococci, enterococci, Campylobacter jejuni, and gram-negative bacteria resistant to antimicrobial agents. J Clin Microbiol 30, 3243–8.
19. Jorgensen, J. H., Ferraro, M. J., McElmeel, M. L., Spargo, J., Swenson, J. M. & Tenover, F. C. (1994). Detection of penicillin and extended-spectrum cephalosporin resistance among Streptococcus pneumoniae clinical isolates by use of the E test. J Clin Microbiol 32, 159–63.
20. Croco, J. L., Erwin, M. E., Jennings, J. M., Putnam, L. R. & Jones, R. N. (1994). Evaluation of the Etest for antimicrobial spectrum and potency determinations of anaerobes associated with bacterial vaginosis and peritonitis. Diagn Microbiol Infect Dis 20, 213–9.
21. Espinel-Ingroff, A. & Kerkering, T. M. (1991) Spectrophotometric method of inoculum preparation for the in vitro susceptibility testing of filamentous fungi. J Clin Microbial, 29, 393–4.
22. Hostettmann K (1999). Strategy for the biological and chemical evaluation of plant extracts. Pure Appl. Chem. 70(11): 1-9.
23. Schmourlo G, Mendonca-Filho RR, Alviano CS, Costa SS (2004). Screening of antifungal agents using ethanol precipitation and bioautography of medicinal food plants. J. Ethnopharmacol. 96(3): 563-568
24. Goodall RR, Len AAA (1946). Micro-chromatographic method for the detection and approximate determination of the different penicillins in a mixture. Nature 158: 675-676.
25. Waters, J.B., Oldstone,M.B.A., and Hahn, K.M.(1996) Changing in cytoplasmic stracture of CTLs during target cell recognition and killing.J.Immunol.157,3396-3402
26. Jahn, B., Martin, E., Stueben, A. & Bhakdi, S. (1995) Susceptibility testing of Candida albicans and Aspergillus species by a simple microtiter menadione-augmented 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay. J Clin Microbiol, 33, 661–7.
27. Paull, D. K., Shoemaker, H. & Boyd, M. R. (1998) The synthesis of XTT: a new tetrazolium reagent that is bioreducible to a water-soluble formazan. J Heterocycl Chem, 25, 911–4.
28. Basri DF, Fan SH (2005). The potential of aqueous and acetone extracts of galls of Quercus infectoria as antibacterial agents. Indian J. Pharmacol. 37(1): 26-29.

   

---

  Committee for Clinical Laboratory Standards [1] National

[2] British Society for Antimicrobial Chemotherapy

[3] European Union Committee for Antimicrobial Susceptibility Testing

[4] Bioassay guided fractionation

زلزله 4.2 ریشتری هم اکنون

زلزله 4.2 ریشتری هم اکنون تهران را لرزاند

راههای بالابردن ویتامین سی C

راههای بالابردن ویتامین سی C

یکی دیگر از ویتامینهای محلول در آب، ویتامین C  یا اسید آسکوربیک می باشد. تعریف کمبود این ویتامین را می توان در «تبس»  Thebus(شهری در مصر) از 1500 سال قبل از میلاد مسیح یافت. حدود 400 سال پیش از میلاد مسیح، بقراط عوارض کمبود آن را شرح داده است و در حکایات و داستانهای قدیمی نیز شرحی از علایم این بیماری دیده شده است. جیمز لیند در سال 1753م (1132ش). بر مبنای مطالعات خود گزارش می کند که از دویست سال قبل به تأثیر مرکبات در رفع عوارض کمبود این ویتامین پی برده بودند. مطالعات او به وسیله دانشمند دیگری ادامه یافت و او توانست به کمک مرکبات، اسکوربوت (نام بیماری کمبود ویتامین) شایع شده در بین ملوانان را ریشه کن سازد. با این وجود به علت بی توجهی به این تحقیقات و یافته های حاصل از آنها، در سال 1912 طی مسافرتی که کاپیتان  Scottبه سواحل جنوبی قطب انجام داد، ملوانان خود را از هر گونه منبع ویتامین C محروم نمود که خود فاجعه ای در تاریخ بود. اولین بار برای کشف ویتامین C در سال 1907 (1286ش) بر روی خوکچه هندی که همانند انسان نسبت به کمبود اسیدآسکوربیک حساس است، مطالعاتی

انجام شد.

ویتامین C از غده فوق کلیوی، پرتقال و کلم استخراج گردید، البته بدون اینکه خصوصیات ویتامینی آن مشخص شود. در سال 1932 گلن کینگ ویتامین C را از لیموترش استخراج نمود و دو دانشمند دیگر ساختمان شیمیایی آن را کشف و بدین وسیله ساخت این ویتامین عملی گردید.

* خصوصیات شیمیایی

 

ویتامین C

اسید آسکوربیک در حقیقت قندی ساده است که به صورت کریستالی سفید رنگ بوده و به صورت خشک، پایدار است. به آسانی با اکسیژن هوا ترکیب می شود خصوصا در برابر گرما. این اکسیداسیون به وسیله حضور مس، آهن و محیط قلیایی بالا می رود. این ویتامین حساسترین ماده آلی موجود در طبیعت است و به جز اسیدها، هر عامل دیگری آن را تخریب می کند. مثلاً اگر در ظروف مسی، آهنی طبخ کنیم، به غذا حرارت شدید و طولانی بدهیم و به آن جوش شیرین بیفزاییم، ویتامین C غذا از بین می رود. همچنین له شدن، پوست کندن و ... در میوه جات و گیاهان سبب از بین رفتن Vitc آنها می گردد. به علت محلول بودن این ویتامین در آب، اغلب در آب پخت، دور ریخته می شود. بهتر است میوه ها و سبزیها را به صورت تازه مصرف کنیم و در صورت نیاز به پخت، با سرعت و در آب کم و در ظرف دربسته طبخ را انجام دهیم.

هنگامی که سبزیجات تهیه شده و 24 ساعت در یخچال نگهداری شوند 45% ویتامین C خود و در محصولات منجمد 52% آن را از دست می دهند. افرادی که در خارج از منزل غذا مصرف می کنند بایستی به این نکات توجه زیادی کنند (مثل سالادهایی که از قبل تهیه و در یخچال رستورانها به مدت طولانی نگهداری می شوند).

انسان، میمون، خوکچه هندی، خفاش هندی، بلبل و ماهی قزل آلا وابسته به منابع غذایی ویتامین  Cهستند و قادر به ساخت آن در بدن خود نمی باشند. در گیاهان در طول مدت رسیدن ویتامین C جمع می شوند و احتمالاً در گیاهان این ویتامین از قند طبیعی میوه ساخته می شود.

* اهمیت ویتامین C در بدن

 

این ویتامین همان طور که می دانیم نقش مهمی در حفظ سلامتی انسان دارد. ویتامین C در مقایسه با سایر ویتامینهای محلول در آب، مستقیما در واکنش رهاسازی انرژی از مواد مغذی عمل نمی کند. این ویتامین فعالیت سلول سالم را حفظ می کند. سلولها را در کنار یکدیگر نگه می دارد. استخوانها و دندانها را قوی می سازد. اندامهای قلبی، عروقی، سیستم عصبی و گوارشی را تشکیل داده و حفاظت می کند.

ویتامین C در حفظ سلامت سیستم ایمنی در مقابله با عفونتها و بیماریها نقش دارد و داروها و آلاینده های محیطی را غیر سمی می کند. این ویتامین سبب حفاظت ویتامینهای A و E و اسیدهای چرب در بدن می شود. ویتامین C جذب کلسیم و آهن موجود در منابع گیاهی را افزایش می دهد. باید گفت ویتامین C معجزه می کند.

* عوارض کمبود ویتامین C

 

چیست؟

اولین علامت کمبود ویتامین C در بیماری اسکوربوت عدم تشکیل ماده ای به نام کلاژن است. کلاژن ماده پروتئینی است که بافتها را به هم متصل می کند و مشابه سیمانی است که موقع روی هم گذاشتن آجر جهت پیوند آنها به یکدیگر مصرف می شود.

با وجودی که در تمام بافتها یافت می شود، ولی جزء اصلی پوست، غضروف، دندان، جای زخم و استخوان است. اختلال در ساخت این ماده بخصوص در بافتهایی که تحت استرس هستند، به وجود می آید. زخمها جهت التیام به مقدار زیادی ویتامین C نیاز دارند. در فقدان آن، از دست دادن سریع کلاژن منجر به ضعف و تجزیه بافت در حال التیام می گردد. بعضی اوقات در فقدان این ویتامین که برای نگهداری غضروف محافظ استخوان لازم است، استخوان از محل خود بیرون می آید و شکل نامنظمی به خود می گیرد.

تغییرات در ساختمان دندان بیشتر وابسته به وضع ویتامین C در دوره بحرانی تشکیل دندان است. ویتامین C به علت نقش مهمی که در اعمال مغزی ایفا می کند به هنگام کمبود، سبب خستگی و ضعف در افراد مبتلا به اسکوربوت می گردد.

این ویتامین احتمالاً در پیشگیری از بیماری قلبی ـ عروقی، کاهش کلسترول خون و پایین نگه داشتن چربی خون نقش دارد.

بیماری ناشی از کمبود ویتامین C همان طور که گفته شد اسکوربوت نام دارد. کوفتگی، خونریزی زیرپوستی، افتادن دندانها، خونریزی لثه ها، تأخیر در بهبود زخمها، درد مفاصل و پاره شدن غضروفها و افزایش استعداد به عفونتها مشخصه های این بیماری هستند. بیماری اسکوربوت اطفال اولین بار در اواخر قرن نوزدهم موقعی که به جای شیر دایه از شیرهای حاضری استفاده می کردند، مشاهده شد. با اجباری کردن پاستوریزاسیون شیر، بیماری افزایش یافت. این بیماری بیشتر در اطفالی دیده می شد که از شیرهای حاضری پس از مدتها حرارت دیدن استفاده می کردند و همزمان به آنها آب میوه و یا سایر منابع ویتامین C هم داده نمی شد. همین طور مادرانی که در دوران بارداری از مقدار زیاد از حدی ویتامین  Cاستفاده می نمایند، کودکان خود را دچار نیاز زیاد، بیش از مقدار موجود در شیر یا شیرخشک، به این ویتامین می کنند.

این موضوع با تحقیقاتی که بر روی خوکچه هندی انجام شده نیز به اثبات رسیده است. دادن شیر مادر، غنی سازی غذای کودک و مصرف مکمل ویتامین C، مؤثرترین روش اطمینان از مصرف کافی ویتامین C و پیشگیری از اسکوربوت دوران کودکی است.

لازم است بدانیم که تحت برخی شرایط نیاز به این ویتامین افزایش می یابد، مصرف سیگار تا 50 درصد نیاز را زیاد می کند. بیماران مبتلا به عفونتهایی مثل ذات الریه، تبهای روماتیسمی، سل و ... به مقدار بیشتری از این ویتامین نیازمندند. افراد دچار سوختگی یا شکستگی و همچنین خانمهایی که از قرصهای ضد بارداری استفاده می کنند نیز بایستی مصرف ویتامین C خود را افزایش دهند. به طوری که نشان داده شده است در مناطق سردسیر مقدار زیاد ویتامین C اثرات مفیدی داشته است و این افراد درجه حرارت پوست بدن را متعادلتر نگه می دارند و کمتر دچار یخ زدگی پاها می شوند.

شواهدی موجود است که نشان می دهد ویتامین C عمل صرفه جویی کردن را در رابطه با چندین ویتامین گروه B ـ تیامین، ریبوفلاوین، نیاسین، اسیدپانتوتنیک، پیریدوکسین، بیوتین و اسید فولیک ـ دارد. به نظر می رسد که ویتامین  Cمی تواند در برخی موارد جانشین آنها شود و در مواردی دیگر از تخریب آنها جلوگیری نماید.

جالب است بدانید که دریافت کم ویتامین C در انسان و حیوان می تواند باعث تولید سنگهای صفراوی شود. لذا بایستی به زنان باردار، زنان تحت درمان با قصرهای استروژن و مصرف کننده قرصهای ضد بارداری، افراد چاق، افراد سالمند و افراد مبتلا به ناراحتی قند ـ همه آنهایی که در خطر کمبود ویتامین C هستند ـ در رابطه با ابتلا به سنگهای صفراوی هشدار داد.

اختلالات عصبی ناشی از کمبود این ویتامین شامل هیپوکندری (ناراحتی بی مورد در مورد وضع سلامتی خود)، هیستری و افسردگی به دنبال کاهش اعمال عصبی ـ حرکتی می باشد.

* ویتامین C و سرطان

 

نقش ویتامین C در پیشگیری از سرطان کاملاً قابل تفکر است. اطلاعات محدودی در مورد اثر محافظتی این ویتامین در برابر برخی از انواع سرطانها شامل سرطان مری و معده وجود دارد. همچنین این ویتامین در پیشگیری از سرطان مثانه و روده بزرگ نقش دارد. لذا اثرات محافظتی میوه ها و سبزیجات علیه بسیاری از بدخیمی ها تأیید می شود. این ویتامین سبب مهار تشکیل مواد سرطان زا در دستگاه گوارش می شود. در برخی مطالعات اثر حفاظتی ویتامین C در برابر سرطان، به همراه مصرف توأم آن با ویتامین E مشاهده شده است.

* چه بخوریم تا به کمبود

 

ویتامین  Cدچار نشویم؟

مصرف 4 ـ 2 واحد میوه (هر واحد تقریبا 1 میوه متوسط ترجیحا از مرکبات) و 5 ـ 3 واحد سبزی (هر واحد 1 لیوان خردشده به صورت خام یا 21 لیوان به صورت پخته می باشد) جهت اطمینان از دریافت کافی ویتامین C به طور روزانه توصیه می شود. جذب ویتامین C از آب مرکبات خیلی خوب است. سبزیجات دارای برگ سبز نیز از میان سبزیجات بهترین منابع ویتامین C هستند. به طور کلی مصرف فلفل دلمه ای، گوجه فرنگی، کلم، گوجه سبز به عنوان منابع بسیار خوب تأمین کننده ویتامین C توصیه می شود. از بین میوه ها پس از مرکبات، توت فرنگی و سایر توتها و همچنین گرمک منابع خوبی هستند. اگر سیب زمینی به مقدار قابل توجهی خورده شود و به مقدار مناسب پخته شود می تواند نیاز انسان را تأمین کند. پیاز هم اگر به مقدار زیاد خورده شود، قسمت قابل توجهی از نیاز را تأمین می کند. از میان منابع حیوانی شیر و جگر را می توان نام برد ولی نمی توانیم به این منابع متکی باشیم. خوب است بدانیم که بهترین روش طبخ سبزیجات پختن آن در آبی است که ابتدا جوش آورده ایم و به مدت 30 ـ 20 دقیقه بپزیم تا ویتامین C آن تا حدودی حفظ شود.

در جدول 1 مقدار ویتامین C در بعضی از مواد غذایی آورده شده است.

جدول 1 ـ مقدار ویتامین C در بعضی از مواد غذایی:

نوع غذامیلی گرم ویتامین C

در 100 گرم ماده خوراکی

بادمجان5

انگور7

گلابی7

آلو7

هندوانه7

هلو8

هویج8

کرفس9

پیاز10

چقندر10

زردآلو10

گیلاس10

موز10

خیار11

ذرت12

کدوی پاییزه13

آناناس17

سیب زمینی20

توت21

کدوی بهاره22

گوجه فرنگی23

نخود سبز27

لوبیا سبز29

بامیه31

طالبی33

گریپ فروت38

لیمو46

کاهو47

پرتقال50

اسفناج51

توت فرنگی59

گل کلم78

فلفل سبز دلمه ای127

نیاز به این ویتامین 60 میلی گرم در روز می باشد که البته به هنگام بارداری و شیردهی این مقدار افزایش می یابد. این ویتامین از روده کوچک جذب می شود. برای دریافت 20 تا 120 میلی گرم جذب ویتامین 90% می باشد و در دریافت خیلی زیاد 12 گرمی که غالبا خودسرانه مصرف می شود جذب فقط 16% می باشد.

* مسمومیت ناشی از اضافه

 

دریافت ویتامین C

مسمومیت در نوزادان نارس و کم وزنی که به آنها ویتامین C به صورت مولتی ویتامین داده می شود به صورت کم خونی دیده شده است. در بسیاری از کشورها افراد سالم بیشتر از مقدار توصیه شده ویتامین C (به شکل قرص) مصرف می کنند. آثار سوء مصرف بیش از نیاز شامل تهوع، استفراغ و اسهال، جذب زیاد آهن، افزایش دفع اسیداوریک (خطرآفرین برای افراد مستعد نقرس) و تشکیل سنگهای کلیوی در افراد مستعد سنگ سازی و بروز نشانه های محرومیت از ویتامین C در اشخاصی که به دریافت زیاد ویتامین عادت کرده اند، می باشد.

* یک دستور غذایی

 

«سالاد میوه در پوست هندوانه»

 

برای 6 تا 8 نفر

 

مواد لازم

 

هندوانه گرد و کوچک، 1 عدد

شاتوت، تمشک، انگور فرنگی و انگور یاقوتی، 450 گرم

طالبی بریده شده به صورت مکعبی، 200 گرم

گلابی ورقه شده، 200 گرم

سیب ورقه شده، 200 گرم

شکر، 100 گرم

آب انبه یا آب آناناس، 3 فنجان

سرکه قرمز یا آب لیموترش تازه، 3 قاشق سوپخوری

نعنا، چند برگ

هندوانه را بشویید. با کارد، کمتر از نصف آن را جدا کنید و گوشت آن را کاملاً بیرون بیاورید و تخمهای آن را خارج کنید و به صورت مکعبهای کوچک خرد کنید. آن را همراه میوه های خردشده دوباره به داخل هندوانه برگردانید و در یخچال بگذارید. آب میوه را همراه سرکه و شکر بجوشانید، بگذارید سرد شود. قبل از بردن سر سفره روی سالاد بریزید و با نعنا تزیین کنید.

فهرست منابع و مأخذ:ـــــــــــــــــــــ

1ـ امین پور، آزاده، اصول علم تغذیه، تهران، شرکت سهامی انتشار، بهار 72، صص 216 ـ 206.

2ـ فروزانی، مینو، مبانی تغذیه، تهران، شرکت سهامی چهر، 1372، صص 394 ـ 369.

3ـ خلدی، ناهید، اصول تغذیه رابینسون، تهران، نشر سالمی، بهار 78، صص 155 ـ 152.

4ـ سعادت نوری، منوچهر، اصول نوین تغذیه در سلامتی و بیماری، سازمان انتشارات اشرفی، 1370، صص 386 ـ 381.

5ـ بهکام، مهر 1371، شماره 23، ص25.

6ـ نیاکان لاهیجی، محمدرضا، تغذیه و سرطان، انتشارات شهر آب، زمستان 1375، ص25 و 50.

7- Mahan,L.K. Krausse's Nutrition and DietFood Therapy. W.B. Saunderscompany. 9thed. 1996.

حکیم  باشی

 

گیاهان مؤثر

 

بر بیماریهای روده

 

برای علاقه مندان حفظ صحت دستگاه گوارش لازم است که گاهگاهی از تخم شربتی، تخم بالنگو، تخم ریحان، اسپرزه و داروهای ملین گیاهی برای جلوگیری از خراشها و آسیبهای احتمالی روده ها میل نمایند. مثلاً زیره یکی از داروهای مقوی دستگاه گوارش است که در برقراری سلامتی آنها نقش مؤثرتری را به عهده دارد.

نسخه ضد اسهال ـ ضد نفخ و ضد

 

هضم ناقص:

صمغ عربی 5 گرم، کتیرا 5 گرم، نشاسته 10 گرم، تخم مورد 10 گرم، فوفل 5 گرم، خارخسک 20 گرم، مغز ناخنک 20 گرم، سیاه دانه 10 گرم، بلوط 5 گرم و گلنار 5 گرم.

همه را (غیر از سه تای اولی) نیم کوب کرده، روزی 10 گرم از آن را در دو نوبت جوشانده صبح و عصر میل نمایید. نشاسته، کتیرا و صمغ عربی را نرم کوبیده، روی جوشانده ها پاشیده و میل نمایید.

منبع:ـــــــــــــــــــــ

صانعی، صفدر، نسخه شفا (گل و گیاه)، انتشارات حافظ نوین، تهران، 1378، ص 272 ـ 271.

همه چیز درمورد باکتری سالمونلا انتریکا

همه چیز درمورد باکتری سالمونلا انتریکا

Salmonella enterica

From Wikipedia, the free encyclopedia

 

Jump to: navigation, search

Salmonella enterica
S. enterica Typhimurium colonies on a Hektoen enteric agar plate
Scientific classification
Domain:	Bacteria
Kingdom:	Eubacteria
Phylum:	Proteobacteria
Class:	Gammaproteobacteria
Order:	Enterobacteriales
Family:	Enterobacteriaceae
Genus:	Salmonella
Species:	S. enterica
Binomial name
Salmonella enterica (ex Kauffmann & Edwards 1952) Le Minor & Popoff 1987
Subspecies
S. enterica subsp. arizonae S. enterica subsp. diarizonae S. enterica subsp. enterica S. enterica subsp. houtenae S. enterica subsp. indica S. enterica subsp. enteritidis S. enterica subsp. salamae

Salmonella enterica (formerly Salmonella choleraesuis) is a rod-shaped, flagellated, facultative anaerobic, Gram-negative bacterium and a member of the genus Salmonella.^[1] A number of its serovars are serious human pathogens.

 

Contents

 [hide] 

• 1 Epidemiology
• 2 Pathogenesis
• 3 Small non-coding RNA
• 4 Nomenclature
• 5 See also
• 6 References
• 7 External links

 

Epidemiology[edit]

Main article: Salmonellosis

Most cases of salmonellosis are caused by food infected with S. enterica, which often infects cattle and poultry, though also other animals such as domestic cats^{[2][citation needed]} and hamsters^[3] have also been shown to be sources of infection to humans. However, investigations of vacuum cleaner bags have shown that households can act as a reservoir of the bacterium; this is more likely if the household has contact with an infection source, for example members working with cattle or in a veterinary clinic.

Raw chicken eggs and goose eggs can harbor S. enterica, initially in the egg whites, although most eggs are not infected. As the egg ages at room temperature, the yolk membrane begins to break down and S. enterica can spread into the yolk. Refrigeration and freezing do not kill all the bacteria, but substantially slow or halt their growth. Pasteurizing and food irradiation are used to kill Salmonella for commercially produced foodstuffs containing raw eggs such as ice cream. Foods prepared in the home from raw eggs such as mayonnaise, cakes, and cookies can spread salmonella if not properly cooked before consumption.

Pathogenesis[edit]

Secreted proteins are of major importance for the pathogenesis of infectious diseases caused by Salmonella enterica. A remarkable large number of fimbrial and non-fimbrial adhesins are present in Salmonella, and mediate biofilm formation and contact to host cells. Secreted proteins are also involved in host cell invasion and intracellular proliferation, two hallmarks of Salmonella pathogenesis.^[4]

Small non-coding RNA[edit]

Small non-protein coding RNAs (sRNA) are able to perform specific functions without being translated into proteins. 97 bacterial sRNAs from Salmonella Typhi were discovered by Chinni et al.^[5]

Nomenclature[edit]

Salmonella enterica has 7 subspecies, and each subspecies has associated serovars that differ by antigenic specificity.^[6] There are over 2500 serovars for S. enterica.^[7] Salmonella bongori was previously considered a subspecies of S. enterica, but it is now the other species in the Salmonella genus. Most of the human pathogenic Salmonella serovars belong to the S. enterica subsp. enterica subspecies. These serogroups include Salmonella Typhi, Salmonella Enteritidis, Salmonella Paratyphi, Salmonella Typhimurium, and Salmonella Choleraesuis. The serovars can be designated as written in the previous sentence (capitalized and non-italicized following the genus), or as follows: "S. enterica subsp. enterica, serovar Typhi."

See also[edit]

• 1984 Rajneeshee bioterror attack
• Bacterial small RNA
• Contamination control
• PinT small RNA
• HilD 3'UTR
• AsdA small RNA
• Typhoid Mary

References[edit]

1. Jump up ^ Giannella RA (1996). Baron S; et al., eds. Salmonella. In: Baron's Medical Microbiology (4th ed.). Univ of Texas Medical Branch. ISBN 0-9631172-1-1. (via NCBI Bookshelf). 
2. Jump up ^ Food Poisoning News
3. Jump up ^ Swanson SJ, Snider C, Braden CR, et al. (2007). "Multidrug-resistant Salmonella enterica serotype Typhimurium associated with pet rodents". New England Journal of Medicine. 356 (1): 21–28. doi:10.1056/NEJMoa060465. PMID 17202452. 
4. Jump up ^ Hensel M (2009). "Secreted Proteins and Virulence in Salmonella enterica". Bacterial Secreted Proteins: Secretory Mechanisms and Role in Pathogenesis. Caister Academic Press. ISBN 978-1-904455-42-4.